ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
以下是常见样本类型的处理要点:
1.血清/血浆
采集:使用不含检测指标的EDTA或肝素抗凝管收集血液,避免溶血。
离心:2000-3000×g,4℃离心10-15分钟,分离血清/血浆。
保存:分装后-80℃冻存(避免反复冻融),短期可-20℃保存(需尽快检测)。
2.组织匀浆
取材:新鲜组织,生理盐水冲洗后吸干水分。
匀浆:按重量(g):体积(mL)=1:9-10加入预冷PBS或裂解液(含蛋白酶抑制剂),匀浆后冰上静置30分钟。
离心:12000×g,4℃离心10-15分钟,取上清。
保存:同血清/血浆。
3.细胞裂解液
收集细胞:用PBS洗涤细胞2-3次,离心弃上清。
裂解:加入RIPA裂解液(含蛋白酶抑制剂),超声破碎或反复冻融裂解。
离心:12000×g,4℃离心20分钟,取上清。
保存:同上。
4.粪便/其他生物样本
预处理:粪便需匀浆后加入溶剂(如氯仿-甲醇混合液)提取脂类,离心后取有机相干燥再复溶。
保存:避免氧化,建议分装后-80℃保存。
关键注意事项:
避免脂质污染(如使用氯仿提取时需chedi去除溶剂残留)。
样本中可能内源性含有结合蛋白,需确保裂解充分。
避免反复冻融(建议分装保存)。