检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被甲羟戊酸（Mevalonate）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲羟戊酸（Mevalonate）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细...

一、实验原理用抗-HBe包被固相载体后，同时加被检血清和合适滴度中和试剂HBeAg，若被检血清中含有抗-HBe，则与包被抗-HBe竞争结合HBeAg，被检标本中抗-HBe越多，HBeAg被结合越多，而与包被抗-HBe结合就越少，加底物后显色就越浅；反之越深。二、主要试剂与器材ELISA试剂盒：内含已包被抗-HBe板条、HRP-抗HBe溶液、中和试剂HBeAg溶液、阳性和阴性对照血清，底物溶液（A液、B液）、终止液、洗涤液。三、结果分析1.P/N≤0.3为阳性。P/N＞0.3为...

ELISA试剂盒检测血清的详细留意事项：1)要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因而，在以HRP为符号酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很简单在温育过程中吸附于固相，然后与后边参加的HRP底物反应显色。2)冰冻保存的血清标本须留意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果，然后引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应留意，不要进行剧烈振荡，重复倒置混匀即可。3)标...

1.样本本身含量可以被检测，有哪些原因导致测值低呢？1）试剂盒的保存试剂盒要按照规定的方法保存，大家在购买试剂盒时请务必留心试剂盒不同组分的保存方法。2）样本上样前的准备这个过程包括样本的制备、保存以及是否有经历过反复冻融。样本的制备要根据样本类型采用不同的方法，血清、血浆与细胞裂解液的制备方法均不同。保存，包括保存温度以及保存时间。一般推荐样本制备后进行分装后储存在-20度或-80度，储存时间不宜过久，因为长时间的储存有可能导致目标蛋白的降解，致使检测结果不理想。最后注意不...

1.培养基污染：若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染。比如培养基灭菌不chedi，开瓶时间过长，灭菌后存放时间过长等；高温蒸汽灭菌器的温度、压力、时间没有正确设置；过滤灭菌过程中滤膜孔径选择、过滤灭菌器的灭菌处理、过滤灭菌操作等均会影响培养基的灭菌效果。措施：严格按照实验要求，灭菌规程操作。3.操作环节污染：接种室是否清洁、干燥、密封，是否经常用紫外灯照射、甲醛熏蒸、70%的酒精喷雾杀菌等；超净工作台摆放物品杂乱，长时间不换滤网，导致净化能力降低；接种用具...

1.细胞污染的预防①实验用品防止污染。细胞培养所用试剂、耗材、器材的清洗、消毒要cedi，各种溶液灭菌要仔细，并在无菌实验检测阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁、消毒、灭菌。②操作过程防止污染。③穿着容易起静电或吸附灰尘的衣物必须更换为白大褂后才能进入细胞间。④实验开始前需要确定戴的手套没有问题，只要接触过生物安全柜之外的物品，必须及时对手套进行消毒。⑤进入细胞培养间后关好门，坐下来尽量少走动以免影响生物安全柜的风帘。工作开始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶盖。事...

在elisa试剂盒实验操作中，误差分为系统误差、偶然误差、过失误差，而一个小小的误差就能够影响到实验，很多人往往因为一个小细节，一个误差没能让实验成功。那么实验误差概率如何缩小？上海恒远生物公司教您些妙招优化ELISA，减少误差：⒈检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械，具有定总结和分析问题的能力，对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。⒉使用校对过的微量移液器，排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。⒊仔细阅读说明书，严格按照说明书...

培养基灭菌能否取决于以下要素：1、灭菌锅内空气是不是排净这个是影响灭菌是温度和压力比例关系的关键，一样到达了一样的压力的情况下，假如空气未能排净，也就是说不是纯蒸汽灭菌，此刻的温度纷歧定能到达意图请求，会严重影响灭菌效果。2、湿热灭菌湿热灭菌时，微生物被杀死的一起，营养成分也遭到了必定的损坏，特别是氨基酸和维生素。如在121℃，仅20min，就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被损坏，蛋氨酸和色氨酸也有适当数量被损坏。在热的效果下某些营养成分还也许因受热而相互之间发作反...