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小鼠白细胞介素17F(IL-17F)elisa试剂盒 是一种用于定量检测小鼠生物样本(如血清、血浆、组织匀浆等)中IL-17F浓度的免疫分析工具。以下是关于该试剂盒的详细说明及使用建议:
基于酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,利用夹心法或竞争法:
夹心法:使用两个特异性抗体分别捕获和检测IL-17F,适用于更高灵敏度的检测。
竞争法:样本中的IL-17F与酶标IL-17F竞争结合固相抗体,通过显色强度与标准曲线对比,定量样本中IL-17F浓度。
预包被微孔板:固相载体,吸附捕获抗体或抗原。
标准品:已知浓度的IL-17F溶液(梯度稀释)。
酶标试剂:辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体或抗原。
底物A/B液:显色剂(如TMB)。
终止液:终止显色反应。
洗涤液:用于洗去未结合物质。
封板膜:防止孔间污染。
说明书:操作指南及数据解读。
样本处理:
血清/血浆:离心分离,避免溶血或脂血。
组织匀浆:匀浆后离心取上清,按说明书比例稀释。
加样:
加入标准品、样本及空白孔。
孵育:
室温(通常1-2小时)孵育,使抗原-抗体充分结合。
洗涤:
用洗涤液洗板3-5次,去除未结合物质。
加酶标试剂:
加入酶标二抗(或检测抗体),二次孵育。
显色与终止:
加入底物显色(10-15分钟),终止液终止反应。
读数:
用酶标仪在450 nm波长测定OD值,绘制标准曲线计算浓度。
样本要求:
避免反复冻融,样本需新鲜或分装-80℃保存。
溶血或高脂样本可能干扰结果。
实验控制:
设立空白对照、复孔及标准曲线,确保数据可靠性。
操作规范:
严格避免交叉污染,加样时更换枪头。
洗涤chedi,避免背景偏高。
结果分析:
标准曲线线性范围需覆盖样本浓度,超出范围需稀释或浓缩样本。
小鼠白细胞介素17F(IL-17F)elisa试剂盒
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