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Plant(GABA)植物γ氨基丁酸elisa检测试剂盒 实验
一、检测原理
ELISA(酶联免疫吸附测定)基本原理是通过抗原 - 抗体特异性结合。对于植物GABA的检测,试剂盒中会有针对GABA的特异性抗体。
当样本(植物组织提取物等)中的GABA与包被在微孔板上的抗体结合后,再加入酶标记的另一特异性抗体,形成“抗体 - 抗原 - 酶标抗体"的复合物。
最后通过加入底物,酶催化底物发生显色反应,颜色的深浅与样本中GABA的含量成正比,从而根据标准曲线测定样本中GABA的含量。
二、试剂盒组成
包被板
通常为微孔板,上面包被有针对植物GABA的特异性抗体,用于捕捉样本中的GABA。
酶标抗体
酶标记的GABA抗体,能与结合在包被板上的GABA进一步特异性结合。
标准品
已知浓度的GABA标准品,用于制作标准曲线,以确定样本中GABA的含量。
洗涤液
用于清洗微孔板,去除未结合的物质,减少非特异性反应。
底物液
含有酶作用的底物,在酶的催化下会发生显色反应。
终止液
用于终止显色反应,使颜色稳定以便于读数。
三、使用步骤(一般流程)
样本准备
采集植物样本,如叶片等,进行适当的处理(如研磨、提取等)得到植物组织提取物。
加样
在微孔板的相应孔中分别加入标准品和样本,一般每个样品需要设置复孔。
孵育
让样本中的GABA与包被抗体充分结合,通常需要在一定温度(如室温或4℃)下孵育一定时间(如30分钟 - 数小时不等)。
洗涤
加入洗涤液,洗去未结合的物质。
加酶标抗体
加入酶标记的抗体,再次孵育,使酶标抗体与结合在包被板上的GABA结合。
再次洗涤
去除未结合的酶标抗体。
加底物液
酶催化底物发生显色反应,孵育一定时间。
加终止液
终止显色反应。
读数
使用酶标仪在特定波长(如450nm等)下读取各孔的光密度值,根据标准曲线计算样本中GABA的含量。
四、Plant(GABA)植物γ氨基丁酸elisa检测试剂盒 实验 应用领域
植物生理研究
了解植物在不同环境条件(如干旱、盐渍、低温等)下GABA的活性变化,因为GABA在光合作用中起着重要作用,其活性变化可以反映植物光合机构的状态。
作物育种
筛选GABA活性较高的作物品种,为培育高产、抗逆的优良品种提供依据。
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