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ELISA试剂盒
小鼠ELISA试剂盒
48T/96T小鼠甘油二酯(DAG;DG)elisa试剂盒
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小鼠甘油二酯(DAG;DG)elisa试剂盒介绍:
一、试剂盒组成
通常包括:
预包被微孔板:特异性结合DAG;DG的捕获抗体。
标准品:已知浓度的DAG;DG溶液。
检测抗体:标记酶(如辣根过氧化物酶HRP)的DAG;DG抗体。
底物A/B:显色反应试剂(如TMB)。
终止液:终止显色反应。
洗涤缓冲液:用于清洗孔内非特异性结合物质。
封板膜:防止反应过程中蒸发。
说明书:操作指南及注意事项。
二、小鼠甘油二酯(DAG;DG)elisa试剂盒检测原理
基于竞争抑制法或夹心法(具体取决于试剂盒设计):
夹心法:样本中的DAG;DG与固相抗体结合,再与酶标二抗结合,通过底物显色定量。
竞争法:DAG;DG与酶标抗体竞争结合固相抗体,显色强度与样本中DAG;DG浓度成反比。
三、应用领域
第三方研究所。
医院研究。
高校研究。
四、实验步骤(简略)
样本处理:离心血清/血浆,匀浆组织并提取蛋白。
加样:向孔板加入标准品、样本及空白对照。
孵育:加入酶标抗体,室温孵育(如1-2小时)。
洗涤:去除未结合物质。
显色:加入底物,避光孵育至显色。
终止:加入终止液,用酶标仪读取450nm吸光度。
计算:通过标准曲线计算样本浓度。
五、注意事项
样本要求:
避免反复冻融,建议分装保存(-80℃)。
血清/血浆需避免溶血(红细胞释放物质可能干扰检测)。
交叉反应:确保试剂盒特异性(如不与其他吲哚类代谢物交叉反应)。
标准曲线:需覆盖预期样本浓度范围,R²值应>0.99。
仪器校准:使用酶标仪预热并校准波长(通常450nm±10nm)。
实验重复:建议每样本至少3次重复以提高准确性。
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